电子表格如何用电脑绘制HPLC色谱图

1.如何用电脑绘制HPLC色谱图

方法如下：精密取相应对照品，加适当的溶剂溶解，分别精密量取1、2、3、4、5ml（或相应成梯度的量），稀释成各个梯度的溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积为纵坐标，以浓度C为横坐标进行线性回归。

在Excel中就直接可以绘制高效液相色谱法标准曲线。有的色谱工作软件能直接绘制标准曲线。

色谱法也叫层析法，它是一种高效能的物理分离技术，将它用于分析化学并配合适当的检测手段，就成为色谱分析法。色谱法的最早应用是用于分离植物色素，其方法是这样的：在一玻璃管中放入碳酸钙，将含有植物色素（植物叶的提取液）的石油醚倒入管中。

此时，玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗，随着石油醚的加入，谱带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜色的谱带，继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素，并可分别进行鉴定。

色谱法也由此而得名。

2.高效液相色谱仪测定分析要用哪些公式和参数

色谱图 最主要的几个参数：保留时间 峰面积 分离度 拖尾因子 理论塔板数

前面两个（保留时间Rt，峰面积A）可以直接得到；

分离度（resolution）：表示两个相邻色谱峰的分离程度。计算公式：R=2(Rt2-Rt1)/(W1+W2)

Rt1 Rt2 分别表示 峰1 峰2 的保留时间，W1 W2 分别表示 两峰的底峰宽，分离度R≥1.5 表示两峰完全分开。

拖尾因子：表示色谱峰的对称程度 T（拖尾因子）=W0.05h/2d1

W0.05h为5%峰高处的峰宽，d1为峰顶点至峰前沿之间的距离

《中国药典》规定峰高法定量时T应该在0.95-1.05之间，低于0.95为前延峰，高于1.05为拖尾峰。

理论塔板数（theoretical plate number），用于定量表示色谱柱的分离效率

理论塔板数=5.54*(Rt/W0.5)^2 Rt 为保留时间 W0.5为半峰宽

也可以表示为：N=16*(t/w )^2。其中，t是溶质从进样到最大洗脱峰出现的时间，w为该溶质的洗脱峰在基线处的宽度。